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影响菌根真菌黑核菌原生质体分离的因子研究

孔繁翔

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文章导航 > 林业科学研究  > 1996 >  9(1): 15-20
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shu
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shu

影响菌根真菌黑核菌原生质体分离的因子研究

  • 1.

    南京大学环境科学与工程系 南京 210093

  • 基金项目:

    1993～1994年中德合作交流资助项目;1995年国家自然科学基金

Study on the Factors Affecting Protoplast Release in Mycorrhizal Fungus Cenococcum geophilum

  • 1.

    Department fo Environmental Sciellce and Engineering, Nanjing University Nanjing 210O93

  • 摘要: 从菌根真菌黑核菌(Cenococcum geophilum)菌丝分离出原生质体,并获得再生菌落。研究了预处理方法及不同水解酶组合,酶解温度和菌丝密度对原生质体产率的影响。在用胰蛋白酶(20μg·mL-1)预处理后,以0.8M山梨醇为渗透压稳定剂,温度为20C,pH5.5及纤维素酶,溶解酶侧浸解酶处理,可获得较高的原生质体产量。在固体及液体再生培养基中,原生质体均可形成再生菌落,再生率为1%～5%.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和甘露醇脱氢酶活性测定结果表明,分离出的原
    Abstract: Protoplasts were isolated from the mycorrhizal fungus Cenococcum geophilum. To obtain high yield of protoplast,it was very effective to pretreat the mycelium with trypsin(20μg·mL-1 for 1h)and tlien incubated the mycelium in the mixture containing the lytic enzymes with 0.8M sorbitol as the osmotic stabilizer. The effects of different combination of lytic enzymes,density of mycelium in incubation and incubation temperature on the yield of protoplast were investigated.In MMNSO and MMNKCl solid(2%agar)or liquid medium,the protoplasts were regenerated and reversed into normal hyphae. Regeneration rate of protoplast was about 1%～5%.Test of specific activities of glucose-6-phosphate dehydrogenase and mannitol dehydrogenase indicated that there was a similar activity in protoplast as compared with that in mycelium.
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出版历程
  • 收稿日期:  1994-06-29
  • 刊出日期:  2012-03-17

影响菌根真菌黑核菌原生质体分离的因子研究

  • 1. 南京大学环境科学与工程系 南京 210093
  • 收稿日期: 1994-06-29
  • 网络出版日期: 2012-03-17
基金项目:  1993～1994年中德合作交流资助项目;1995年国家自然科学基金

摘要: 从菌根真菌黑核菌(Cenococcum geophilum)菌丝分离出原生质体,并获得再生菌落。研究了预处理方法及不同水解酶组合,酶解温度和菌丝密度对原生质体产率的影响。在用胰蛋白酶(20μg·mL-1)预处理后,以0.8M山梨醇为渗透压稳定剂,温度为20C,pH5.5及纤维素酶,溶解酶侧浸解酶处理,可获得较高的原生质体产量。在固体及液体再生培养基中,原生质体均可形成再生菌落,再生率为1%～5%.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和甘露醇脱氢酶活性测定结果表明,分离出的原

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