-
植物多酚为植物体内具有多元酚结构的次生代谢物，是一种天然有机抗氧化剂，可清除自由基，具有较高的营养和保健价值，目前广泛应用于抗氧化、抗衰老、提高人体免疫力等方面，同时还具有一定的医疗作用，能预防心血管病、抗炎、抗癌等[1-3]。前人对绿茶[4]、红茶[5]、黑茶[6]、花茶[7]等茶叶中的多酚含量、组分、功能等有较详细的研究。
金花茶组（Sect. Chrysantha H. T. Chang）植物属山茶科（Theaceae）山茶属（Camellia L.），为常绿灌木或小乔木，分布于广西、贵州、云南及越南中部和北部。金花茶组植物与茶树（C. sinensis (L.) O. Ktze.）为同科同属植物[8]，其各器官中均含有大量的多酚、黄酮组分[9-10]。金花茶组植物发现较晚，相关研究较少，仅有少量对其叶片多酚[11-12]及花朵类黄酮的研究[13-14]，关于其花朵多酚组分与含量的研究尚未见报道。
叶创兴等[15]、梁盛业[16]、张宏达等[8]、闵天禄[17]及Wu等[18]先后从表观形态学角度研究了金花茶组植物的系统分类。分子标记技术也应用到金花茶组植物亲缘关系的研究中[19-21]；但目前仍有新的金花茶物种被发现或引进[22]，关于金花茶的分类仍存在诸多分歧，因此，需要更多的佐证来解析其分类系统。利用化学标记进行植物分类的研究较多，Li等[23]利用25种黄酮组分作为化学标记研究了山茶属红山茶组（Sect. Camellia (L.) Dyer in Hook.）植物的演化关系，Fan等[24]基于芳香类成分对山茶属连蕊茶组（Sect. Theopsis Coh. St.）22个物种进行了分类研究；Li等基于多酚组分研究了茶树的品种分类与起源[25]及茶树杂交后代与父母本间的亲缘关系[26]。花作为金花茶重要的生殖、分类器官，其多酚组分与含量及其与植物分类的相关性具有重要的研究价值。
本研究利用高效液相色谱（HPLC）方法，对金花茶组植物花朵不同器官的主要多酚组分含量进行测定分析，揭示金花茶组植物花朵中的多酚组成及其物种间的差异，进而利用多酚组分含量对金花茶组植物进行分类，探析多酚组分在金花茶植物分类中应用的可行性。
HTML
-
2018年1、3、9、11月份，分别在广西南宁市金花茶公园（108°20′53″ E，22°49′11″ N，海拔75 m）国家级金花茶种质资源库内，采集金花茶组22个物种全开期的花朵，快速将各花器官分离，分类包装，液氮速冻后，干冰运回实验室，−80℃保存备用。
采样物种：中东金花茶（C. achrysantha Chang et S. Y. Liang）、薄叶金花茶（C. chrysanthoides Chang）、崇左金花茶（C. chuangtsoensis S. Y. Liang et L. D. Huang）、显脉金花茶（C. euphlebia Merr. Ex Sealy）、箱田金花茶（C. hakodae Ninh）、凹脉金花茶（C. impressinervis Chang et S. Y. Liang）、柠檬黄金花茶（C. limonia C. F. Liang et Su）、陇瑞金花茶（C. longruiensis S. Y. Liang et X. J. Dong）、龙州金花茶（C. lungzhouensis Luo）、小花金花茶（C. micrantha S. Y. Liang et Y. C. Zhong）、小果金花茶（C. microcarpa Chang）、多瓣金花茶（C. multipetala S. Y. Liang et C. Z. Deng）、金花茶（C. nitidissima Chi）、小瓣金花茶（C. parvipetala J. Y. Liang et Su）、潘氏金花茶（C. phanii Hakoda et Ninh）、平果金花茶（C. pinggaoensis Fang）、毛籽金花茶（C. ptilosperma S. Y. Lang et Q. D. Chen）、毛瓣金花茶（C. pubipetala Y. Wan et S. Z. Huang）、顶生金花茶（C. terminalis S. Y. Liang）、天峨金花茶（C. tianeensis S. Y. Liang et Y. T. Luo）、东兴金花茶（C. tunghinensis Chang）、武鸣金花茶（C. wumingemsis S. Y. Liang et C. R. Fu）。试验共采集金花茶组植物22个花瓣样品、20个雄蕊样品、14个萼片样品。
标准样品：没食子酸（GA）、没食子儿茶素（GC）、表没食子儿茶素（EGC）、儿茶素（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）和儿茶素没食子酸酯（CG）9种标准样品均购自上海源叶生物科技有限公司。
-
称取样品0.6 g，液氮快速研磨后，倒入25 mL试管中，加入提取液（甲醇:水:甲酸:三氟乙酸=70:27:2:1）5 mL，用石腊膜封口。浸提24 h，中间摇动几次，浸提均匀。提取完成后，用脱脂棉过滤，去掉残渣。用有机微孔过滤膜（0.22 μm）过滤后，将滤液装入进样瓶中，进行上机分析，提取液可暂时避光存放于−20℃冰箱。
-
采用美国安捷伦1260系列高效液相色谱仪（Agilent Technologies 1260 Infinty），色谱柱为Waters SunFire C18色谱柱（4.6 mm× 250 mm，5 μm）。洗脱流动相为：A相：2%的甲酸水溶液；B相：纯乙腈。洗脱程序：0.0～9.0 min，98%降至90.7%的B相；9.0～15.0 min，90.7%的B相；15.0～20.5 min，90.7%降至85%的B相；20.5～29.5 min，85%降至75%的B相；29.5～30.0 min，75%升至98%的B相；30.0～34.0 min，98%的B相。流速为1.0 mL·min−1，进样量为10 μL，柱温为30℃，检测波长278 nm。
-
应用 Microsoft Office Excel 2007 进行数据统计及作图，使用 SPSS- Statistics 19.0 进行单因素方差分析、聚类分析等。
1.1. 试材及取样
1.2. 实验方法
1.2.1. 样品提取
1.2.2. 样品检测
1.3. 数据分析
-
金花茶组22个物种花瓣样品9种多酚组分的HPLC色谱图（图1）显示：在本实验检测环境下，所测9种组分全部可以有效分离，没食子酸（GA）、没食子儿茶素（GC）、表没食子儿茶素（EGC）、儿茶素（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、儿茶素没食子酸酯（CG）可依次鉴定出。9种组分在线性范围内线性良好，相关系数均大于0.999 00（表1）。
Figure 1. HPLC chromatogram of 9 polyphenol standard samples
编号
Number多酚物质
Phenolic compounds回归方程
Regression equation相关系数
Correlation coefficient (R2)1 没食子酸 Gallis(GA) y = 3.041 72x−0.033 008 0.999 99 2 没食子儿茶素 Gallocatechin (GC) y = 2.438 47x+0.349 927 0.999 95 3 表没食子儿茶素 Epigallocatechin (EGC) y = 1.672 58x+0.067 983 0.999 99 4 儿茶素 Catechin (C) y = 7.788 81x−1.848 48 0.999 82 5 表儿茶素 Epicatechin (EC) y = 8.274 20x−1.023 47 0.999 99 6 表没食子儿茶素没食子酸酯 Epigallocatechin gallate (EGCG) y = 13.279 94x−6.832 13 0.999 94 7 没食子儿茶素没食子酸酯 Gallocatechin gallate (GCG) y = 13.806 34x−9.141 65 0.999 92 8 表儿茶素没食子酸酯 Epicatechin gallate (ECG) y = 15.250 54x+7.443 55 0.999 57 9 儿茶素没食子酸酯 Catechin gallate (CG) y = 16.689 06x+3.132 21 0.999 35 Table 1. Regression equation, correlation coefficient of 9 polyphenol standard samples
花瓣样品的9种组分中（表2），GCG、ECG、CG在每个物种均检测到，EC只在箱田金花茶的花瓣中未检测到，EGC、C分别有8个和9个物种未检测到，EGCG有10个物种未检测到，GA仅在6个物种中检测到，GC仅在崇左金花茶中检测到。花瓣中多酚平均含量分别为：EC（0.814 mg·g−1）> EGC（0.155 mg·g−1）>GCG（0.142 mg·g−1）>CG（0.122 mg·g−1）>ECG（0.112 mg·g−1）>C（0.087 mg·g−1）>EGCG（0.023 mg·g−1）>GA（0.012 mg·g−1）>GC（0.007 mg·g−1）。多酚总量中，凹脉金花茶花瓣含量最高为3.069 mg·g−1，平果金花茶与东兴金花茶含量相近且最低，分别为0.546、0.535 mg·g−1。
物种
SpeciesEC EGC GCG ECG C 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 中东金花茶
C. achrysantha1.189 2.866 − 0.282 1.095 − 0.181 0.473 − 0.072 0.350 − 0.093 0.169 − 薄叶金花茶
C. chrysanthoides0.650 0.640 − NULL 0.280 − 0.021 0.054 − 0.120 0.104 − NULL 0.052 − 崇左金花茶
C. chuangtsoensis0.764 1.086 0.693 0.141 0.378 0.085 0.226 0.188 0.171 0.054 0.163 0.274 0.062 0.032 NULL 显脉金花茶
C. euphlebia0.736 1.013 1.426 0.059 0.064 0.337 0.080 0.162 0.134 0.074 0.231 0.274 0.100 0.024 0.219 箱田金花茶
C. hakodaeNULL 1.195 − 0.149 0.521 − 0.686 0.208 − 0.010 0.110 − NULL 0.085 − 凹脉金花茶
C. impressinervis1.580 1.475 3.050 0.460 0.706 1.144 0.243 0.299 0.539 0.101 0.133 0.333 0.065 0.032 0.068 柠檬黄金花茶
C. limonia0.282 0.255 1.215 0.060 0.057 0.280 0.037 0.011 0.133 0.409 0.038 0.101 NULL NULL 0.023 陇瑞金花茶
C. longruiensis1.076 1.875 1.928 0.137 0.821 0.927 0.194 0.380 0.423 0.073 0.184 0.174 NULL 0.033 0.038 龙州金花茶
C. lungzhouensis0.488 0.778 − NULL 0.224 − 0.069 0.154 − 0.082 0.095 − NULL NULL − 小花金花茶
C. micrantha0.558 0.666 − NULL 0.168 − 0.046 0.035 − 0.207 0.144 − NULL NULL − 小果金花茶
C. microcarpa0.574 0.789 1.389 NULL 0.469 0.318 0.067 0.118 0.128 0.145 0.166 0.847 NULL 0.100 0.028 多瓣金花茶
C. multipetala1.279 3.659 − 0.371 1.707 − 0.319 0.950 − 0.095 0.420 − 0.052 0.086 − 金花茶
C. nitidissima0.736 1.287 1.771 NULL 0.551 0.482 0.061 0.051 0.166 0.061 0.236 0.211 0.040 0.072 0.088 小瓣金花茶
C. parvipetala0.701 0.713 − NULL 0.189 − 0.060 0.088 − 0.067 0.217 − NULL 0.027 − 潘氏金花茶
C. phanii1.516 − − 0.409 − − 0.167 − − 0.105 − − 0.023 − − 平果金花茶 C. pinggaoensis 0.340 0.253 0.677 NULL 0.115 0.177 0.039 0.014 0.084 0.124 0.094 0.083 NULL NULL NULL 毛籽金花茶
C. ptilosperma1.421 1.529 1.450 0.230 0.373 0.138 0.168 0.228 0.287 0.113 0.126 0.143 0.040 0.015 0.023 毛瓣金花茶
C. pubipetala1.561 − 2.261 0.258 − 1.097 0.232 − 0.443 0.095 − 0.211 0.043 − 0.044 顶生金花茶
C. terminalis1.376 2.972 1.635 0.098 0.531 0.527 0.095 0.203 0.213 0.121 0.237 0.157 0.036 0.124 0.023 天峨金花茶
C. tianeensis0.648 1.149 1.228 NULL 0.485 0.430 0.056 0.121 0.157 0.211 0.105 0.111 0.086 0.189 0.051 东兴金花茶
C. tunghinensis0.227 0.671 0.127 0.114 0.115 0.202 0.022 0.071 0.037 0.051 0.097 0.238 0.019 0.052 NULL 武鸣金花茶
C. wumingemsis0.201 0.167 0.332 0.641 0.558 0.874 0.052 0.020 0.040 0.072 0.103 0.146 1.255 0.826 2.612 平均
average0.814 1.252 1.370 0.155 0.470 0.501 0.142 0.191 0.211 0.112 0.168 0.236 0.087 0.096 0.230 总平均 Total average 1.145 0.376 0.181 0.172 0.138 物种
SpeciesCG EGCG GC GA 多酚总量 Total 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 中东金花茶
C. achrysantha0.029 0.105 − 0.014 0.017 − NULL NULL − 0.028 NULL − 1.888 5.075 − 薄叶金花茶
C. chrysanthoides0.270 0.036 − 0.225 0.030 − NULL 0.162 − NULL 0.061 − 1.286 1.419 − 崇左金花茶
C. chuangtsoensis0.095 0.035 0.016 0.013 0.016 0.014 0.146 NULL 0.052 NULL NULL NULL 1.500 1.898 1.305 Table 2. Contents of polyphenols in flowers of yellow Camellia
mg·g−1 续表2 物种
SpeciesCG EGCG GC GA 多酚总量 Total 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 花瓣 Petal 雄蕊 Stamen 萼片 Sepal 显脉金花茶
C. euphlebia0.284 0.061 0.030 NULL 0.016 0.031 NULL NULL 0.032 0.056 0.168 0.038 1.389 1.739 2.521 箱田金花茶
C. hakodae0.090 0.016 − 0.072 0.012 − NULL NULL − NULL NULL − 1.006 2.147 − 凹脉金花茶 C. impressinervis 0.611 0.113 0.158 0.008 0.014 0.016 NULL NULL 0.069 NULL NULL NULL 3.069 2.772 5.377 柠檬黄金花茶
C. limonia0.017 0.252 0.014 NULL NULL 0.013 NULL NULL NULL 0.035 0.031 0.034 0.839 0.644 1.813 陇瑞金花茶
C. longruiensis0.028 0.074 0.043 0.023 0.063 0.090 NULL NULL 0.032 0.041 NULL NULL 1.572 3.430 3.655 龙州金花茶
C. lungzhouensis0.023 0.061 − NULL 0.025 − NULL NULL − NULL NULL − 0.662 1.337 − 小花金花茶
C. micrantha0.111 0.066 − NULL 0.051 − NULL 0.421 − NULL 0.092 − 0.922 1.643 − 小果金花茶
C. microcarpa0.219 0.021 0.012 NULL 0.014 0.079 NULL 0.501 0.036 NULL 0.248 0.032 1.005 2.426 2.869 多瓣金花茶
C. multipetala0.024 0.082 − NULL 0.028 − NULL NULL − NULL NULL − 2.140 6.932 − 金花茶
C. nitidissima0.046 0.058 0.036 0.066 0.168 0.505 NULL NULL 0.037 NULL 0.058 0.039 1.0 2.481 3.335 小瓣金花茶
C. parvipetala0.098 0.024 − NULL 0.046 − NULL NULL − NULL 0.034 − 0.927 1.338 − 潘氏金花茶
C. phanii0.053 − − 0.012 − − NULL − − NULL − − 2.284 − − 平果金花茶
C. pinggaoensis0.007 0.260 0.009 NULL NULL NULL NULL NULL NULL 0.036 NULL NULL 0.546 0.736 1.030 毛籽金花茶
C. ptilosperma0.039 0.105 0.090 0.024 NULL 0.087 NULL NULL 0.026 NULL NULL NULL 2.035 2.376 2.244 毛瓣金花茶
C. pubipetala0.223 − 0.052 0.010 − 0.021 NULL − 0.100 0.058 − 0.071 2.479 − 4.300 顶生金花茶
C. terminalis0.014 0.065 0.041 NULL 0.019 0.014 NULL NULL 0.017 NULL NULL 0.082 1.740 4.151 2.709 天峨金花茶
C. tianeensis0.126 0.036 0.045 0.012 0.033 0.014 NULL NULL NULL NULL NULL 0.052 1.139 2.118 2.088 东兴金花茶
C. tunghinensis0.102 0.028 0.014 NULL 0.019 0.077 NULL NULL 0.068 NULL NULL NULL 0.535 1.053 0.763 武鸣金花茶
C. wumingemsis0.177 0.006 0.014 0.026 0.019 0.072 NULL NULL 0.044 NULL NULL 0.054 2.424 1.699 4.188 平均值
average0.122 0.075 0.041 0.023 0.030 0.074 0.007 0.054 0.037 0.012 0.035 0.029 1.473 2.371 2.728 总平均 Total average 0.079 0.042 0.032 0.025 2.191 注：−：样品不足，未检测，未计数值；NULL：此实验条件下未检测到，按0计算。
Note: −, Insufficient samples, untested and uncounted; NULL, undetected under this experimental condition, counted as 0.所测22个物种中，19个物种的花瓣中EC含量为9种多酚组分中含量最高的，其中，18个物种的花瓣中EC含量占多酚总量的比例超过50%（图2），仅柠檬黄金花茶花瓣中的ECG含量最高，武鸣金花茶花瓣中的C含量最高，箱田金花茶花瓣中的GCG含量最高。
Figure 2. EC/total in 3 kinds of organs in yellow Camellia
-
所测20个物种雄蕊样品的9种组分中（表2），EGC、EC、GCG、ECG、CG 5种组分在每个物种的雄蕊中均检测到，C在4个物种的雄蕊中未检测到，EGCG在3个物种的雄蕊中未检测到；GA仅在7个物种的雄蕊中检测到，GC仅在小果金花茶、薄叶金花茶和小花金花茶3个物种的雄蕊中检测到。雄蕊中多酚平均含量分别为：EC（1.250 mg·g−1）> EGC（0.470 mg·g−1）>GCG（0.191 mg·g−1）>ECG（0.168 mg·g−1）>C（0.096 mg·g−1）>CG（0.075 mg·g−1）>GC（0.054 mg·g−1）>GA（0.035 mg·g−1）>EGCG（0.030 mg·g−1）。多酚总量中，多瓣金花茶雄蕊中最高为6.932 mg·g−1，柠檬黄金花茶雄蕊中含量最低为0.644 mg·g−1。
所测20个物种中，18个物种的雄蕊中EC含量为9种多酚组分中含量最高的，其中，14个物种的雄蕊中EC含量占多酚总量的比例超过50%（图2），仅平果金花茶的雄蕊中CG含量最高，武鸣金花茶的雄蕊中C含量最高。
-
所测14个物种萼片样品中，多酚组分种类较多，其中，GA在其中8个物种的萼片中检测到，GC可在11个物种的萼片中检测到（表2）；C在3个物种的萼片中未检测到，EGCG在平果金花茶的萼片中未检测到，剩余的5种组分在所测14个物种的萼片中均检测到。萼片中多酚平均含量分别为：EC（1.370 mg·g−1）>EGC（0.501 mg·g−1）>ECG（ 0.236 mg·g−1）>C（0.230 mg·g−1）>GCG（0.211 mg·g−1）>EGCG（0.074 mg·g−1）>CG（0.041 mg·g−1）>GC（0.037 mg·g−1）>GA（0.029 mg·g−1）。多酚总量中，凹脉金花茶萼片中含量最高5.377 mg·g−1，东兴金花茶萼片中含量最低为0.763 mg·g−1。
所测的14个物种中，12个物种的萼片中EC含量为9种多酚组分中含量最高，其中，11个物种萼片中的EC含量占多酚总量的比例超过50%（图2），仅有东兴金花茶萼片中ECG含量最高，武鸣金花茶萼片中C含量最高。
3类器官中，花瓣中的CG含量最高，雄蕊中次之，萼片中最低；雄蕊中GA、GC含量最高，萼片中次之，花瓣中最低；萼片中EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG 6种组分及多酚总量均最高，雄蕊中次之，花瓣中最低。总体而言，萼片中的多酚组分含量高于雄蕊和花瓣（图3）。
Figure 3. Contents of polyphenols in 3 kinds of organs from yellow Camellia
-
采用Ward法，分别依据花瓣、雄蕊、萼片3类器官的多酚组分含量，对金花茶组植物进行了聚类分析。22个花瓣样品的多酚组分含量聚类为2大类，4小类：小果金花茶、小花金花茶、金花茶、小瓣金花茶、天峨金花茶、薄叶金花茶、龙州金花茶、东兴金花茶、柠檬黄金花茶、平果金花茶、显脉金花茶11个物种为Ⅰ-A，崇左金花茶、箱田金花茶为Ⅰ-B；陇瑞金花茶、中东金花茶、毛瓣金花茶、顶生金花茶、毛籽金花茶、多瓣金花茶、潘氏金花茶、凹脉金花茶8个物种为Ⅱ-A，武鸣金花茶单独为Ⅱ-B（图4）。
Figure 4. The dendrogram of 22 petal samples in yellow Camellia
20个雄蕊样品的多酚组分含量聚类为3大类，4小类：柠檬黄金花茶、平果金花茶、东兴金花茶、龙州金花茶、小瓣金花茶、薄叶金花茶、显脉金花茶、武鸣金花茶8个物种为Ⅰ-A；顶生金花茶、中东金花茶、凹脉金花茶、陇瑞金花茶、崇左金花茶、箱田金花茶、毛籽金花茶、天峨金花茶、金花茶9个物种为Ⅰ-B；小果金花茶、小花金花茶2个物种为Ⅱ；多瓣金花茶单独为Ⅲ（图5）。
Figure 5. The dendrogram of 20 stamen samples in yellow Camellia
14个萼片样品的多酚组分含量聚类为2大类，3小类：显脉金花茶、小果金花茶、金花茶、柠檬黄金花茶、天峨金花茶、顶生金花茶、崇左金花茶、东兴金花茶、毛籽金花茶、平果金花茶10个物种为Ⅰ-A；武鸣金花茶为Ⅰ-B；凹脉金花茶、陇瑞金花茶、毛瓣金花茶3个物种为Ⅱ（图6）。
Figure 6. The dendrogram of 14 sepal samples in yellow Camellia
将以上3类器官的多酚组分聚类分析结果与金花茶形态分类系统结果进行比较（表3）发现：雄蕊多酚分类结果与分类系统中重复的物种数量较多，均在10个以上，二者分类相同的物种数量也较高（8个以上），与各形态学分类系统的相似率高达80.00%至90.00%，故此结果可以作为分类系统一个很好的补充。花瓣多酚分类结果与分类系统中重复的物种数量也较多（10个以上），但二者分类相同的物种数量较低，相似率仅58.33%至81.82%。萼片多酚分类结果与分类系统中重复的物种数量较低（仅8～11个），虽然与部分分类系统相似率较高（相似率75.00%至88.89%），但其对分类系统的补充作用不稳定，说服力不强。
分类
Classification approach雄蕊Stamen 花瓣 Petal 萼片 Sepals 物种数量
Species number相似率
Similarity rate/%物种数量
Species number相似率
Similarity rate/%物种数量
Species number相似率
Similarity rate/%张宏达，任善湘 Zhang H D, Ren S X[8] 12/14 85.71 10/14 71.43 7/9 77.78 叶创兴，许兆然 Ye Z X, Xu Z R[15] 9/10 90.00 9/11 81.82 8/9 88.89 梁盛业 Liang S Y[16] 12/15 80.00 12/16 75.00 9/11 81.82 闵天禄 Min T L[17] 10/12 83.33 7/12 58.33 6/8 75.00 Wu Z Y, Raven P H, Hong D Y, et al[18] 8/10 80.00 8/10 80.00 7/8 87.50 注：b/a：a-本分类结果和分类系统中重复的物种数量，b-分类相同的物种数量。
Note: b/a: a-number of detected species present in the classification system; b-number of species in the same category.Table 3. Comparison of classification results of polyphenols with morphological classification methods
2.1. 花瓣内多酚组分及含量分析
2.2. 雄蕊内多酚组分及含量分析
2.3. 萼片内多酚组分及含量分析
2.4. 花朵各器官多酚组分含量聚类分析
-
对金花茶组22个物种花朵所测的9种多酚组分中，EC含量最高，多数物种EC含量占多酚总量的比例超过50%，其次是EGC、GCG、ECG，多酚总量也主要与这4种组分呈极显著正相关；GA、GC则在多个样品中未检测到，且总体含量极低。此结果与茶叶的差别较大，茶树中EGCG的含量最高[26]，在黑茶中GA与EGCG的含量很高[6]。另外，武鸣金花茶花朵的多酚总量也较高，但其组分组成与其它物种差别较大，EC含量占多酚总量比例较小，含量最高的组分为C。3类器官中，除GCG、ECG、CG在各物种的3类器官中均检测到，其它组分在多个物种的不同器官中未检测到，多数组分（EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG）及多酚总量，均为萼片中的含量最高，依次大于雄蕊、花瓣中的含量。雄蕊中GA、GC的含量依次大于萼片、花瓣中的含量，CG含量在花瓣中最高，依次大于雄蕊、萼片中的含量。
所测22个物种中，凹脉金花茶花朵的3类器官多酚总量最高为11.218 mg·g−1，平果金花茶与东兴金花茶含量相近且最低，分别为2.312、2.351 mg·g−1。苏建睦等[27]曾利用分光光度计测定3种金花茶的多酚总量，其结果比本研究略高，本实验中未测定雌蕊的多酚含量。陈红娟等[28]曾利用超高效液相色谱-电喷雾离子化-飞行时间质谱法（UPLC-ESI-Triple TOF MS）鉴定金花茶花中的多酚组分，共鉴定96种组分，除本试验测定的9种主要组分外，其它组分也占一定比例，故本实验所测含量略低。
目前，关于金花茶植物分类的争议仍较大，闵天禄[17]和Wu等[18]的分类系统中认为，金花茶不应单独成组，应归并到古茶组中，但叶创兴等[15]、梁盛业[16]、张宏达等[8]认为，应单独设立金花茶组。关于模式种的选择也不确定，闵天禄[17]和Wu等[18]选用C. petelotiiwei (Merr.) Sealy为模式种，叶创兴等[15]、张宏达等[8]选择C. nitidissima Chi为模式种，而梁盛业[16]则选择C. chrysantha (Hu) Tuyama为模式种。各分类系统关注的分类依据也不尽相同，导致金花茶分类系统仍不统一。本研究对比了几个形态分类系统与多酚组分含量的聚类结果，其中，花瓣多酚组分的聚类结果更倾向叶创兴等[15]的分类系统，所测11个物种中9个物种与其分类相同。雄蕊多酚组分的聚类结果与各分类系统的相似率均较高，其中与叶创兴等[15]的分类系统相似率最高，所测10个物种中9个物种均相同。萼片多酚组分的分类结果也与叶创兴等[15]的分类系统相似率最高，所测9个物种中8个物种均与叶创兴等[15]的分类系统相同。因此，本研究更支持叶创兴等[15]的分类系统。
本研究3类器官多酚组分的聚类结果中，雄蕊聚类结果与各形态学分类结果相似率均较高，达到80.00%～90.00%，且雄蕊多酚组分的聚类分析与各分类系统重复的物种数量较多。故雄蕊多酚组分的聚类结果可以较完整地反映形态学分类结果，是对金花茶表型分类的有效补充。
-
金花茶花朵花瓣、雄蕊、萼片3类器官所测的9种多酚组分中，EC含量最高，其次为EGC、GCG和ECG，这4种组分是多酚总量的主要成分。在3类器官中，多酚总量及EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG 6种组分含量的排序为：萼片>雄蕊>花瓣。雄蕊多酚组分的聚类结果可以较完整地反映形态学分类结果，是对金花茶表型分类的有效补充。
DownLoad: