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Volume 34 Issue 1
Jan.  2021
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Geographical Variation and Correlation Analysis of the Main Bioactive Components of Paris polyphylla from Different Provenances

  • Corresponding author: LI Yue-qiao, liyueqiao132@163.com
  • Received Date: 2020-02-10
    Accepted Date: 2020-06-03
  • Objective To clarify the geographical variation of main medicinal components of Paris polyphylla, and provide data for the utilization of germplasm resources and site selection of raw material forest base of P. polyphylla. Method The contents of total phenolic acids, total flavonoids, saponin I, II, VI and VII in rhizomes of 10 P. polyphylla provenances from 8 provinces of China were determined and analyzed. Result There were significant differences in the contents of total phenolic acid, total flavonoids, saponin I, II, VI and VII in rhizomes among these provenances. The variation range of total phenolic acid content in rhizomes among provenances was 1.718-5.436 mg·g−1; the variation range of total flavone content was 0.780-1.457 mg·g−1; the variation ranges of contents of saponin I, II, VI and VII were 0.008-2.106 mg·g−1, 0.000-0.646 mg·g−1, 0.000-0.521 mg·g−1, and 0.000-9.170 mg·g−1. The content of total phenolic acid in rhizome of P. polyphylla was positively correlated with the altitude of origin, the content of saponin Ⅱ was positively correlated with the average temperature of January, and the content of total flavone was negatively correlated with the sunshine hours of the whole year, and the content of saponin Ⅶ was negatively correlated with the altitude. There was a highly negative correlation between total saponin and altitude, a highly positive correlation between saponin II and annual average temperature, a highly positive correlation between saponin VI and the average temperature in July, a moderate positive correlation between total phenolic acid and total flavone content, between total flavone and saponin I content, between saponin I and saponin II content, a highly positive correlation between total saponin and saponin VII content. Cluster analysis showed that the 10 provenances could be divided into three groups: low phenolic acid, low flavone and high saponin groups, high phenolic acid, high flavone, low saponin groups and middle phenolic acid, middle flavone and middle saponin groups. Conclusion The provenance from Guilin of Guangxi Zhuang Autonomous Region is a elite provenance with high phenolic acid and high flavone, and the provenance from Qimen of Anhui Province is a elite provenance with high saponins.
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通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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Geographical Variation and Correlation Analysis of the Main Bioactive Components of Paris polyphylla from Different Provenances

    Corresponding author: LI Yue-qiao, liyueqiao132@163.com
  • Experimental Center for Subtropical Forestry, Chinese Academy of Forestry, Fenyi 336600, Jiangxi, China

Abstract:  Objective To clarify the geographical variation of main medicinal components of Paris polyphylla, and provide data for the utilization of germplasm resources and site selection of raw material forest base of P. polyphylla. Method The contents of total phenolic acids, total flavonoids, saponin I, II, VI and VII in rhizomes of 10 P. polyphylla provenances from 8 provinces of China were determined and analyzed. Result There were significant differences in the contents of total phenolic acid, total flavonoids, saponin I, II, VI and VII in rhizomes among these provenances. The variation range of total phenolic acid content in rhizomes among provenances was 1.718-5.436 mg·g−1; the variation range of total flavone content was 0.780-1.457 mg·g−1; the variation ranges of contents of saponin I, II, VI and VII were 0.008-2.106 mg·g−1, 0.000-0.646 mg·g−1, 0.000-0.521 mg·g−1, and 0.000-9.170 mg·g−1. The content of total phenolic acid in rhizome of P. polyphylla was positively correlated with the altitude of origin, the content of saponin Ⅱ was positively correlated with the average temperature of January, and the content of total flavone was negatively correlated with the sunshine hours of the whole year, and the content of saponin Ⅶ was negatively correlated with the altitude. There was a highly negative correlation between total saponin and altitude, a highly positive correlation between saponin II and annual average temperature, a highly positive correlation between saponin VI and the average temperature in July, a moderate positive correlation between total phenolic acid and total flavone content, between total flavone and saponin I content, between saponin I and saponin II content, a highly positive correlation between total saponin and saponin VII content. Cluster analysis showed that the 10 provenances could be divided into three groups: low phenolic acid, low flavone and high saponin groups, high phenolic acid, high flavone, low saponin groups and middle phenolic acid, middle flavone and middle saponin groups. Conclusion The provenance from Guilin of Guangxi Zhuang Autonomous Region is a elite provenance with high phenolic acid and high flavone, and the provenance from Qimen of Anhui Province is a elite provenance with high saponins.

  • 华重楼(Paris polyphylla var. chinensis (Franch.))又名七叶一枝花,为百合科重楼属植物,主要分布在我国长江以南江苏、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州和云南等省份[1]。华重楼为2015 年版《中国药典》收载的重楼药材的基原植物,以干燥根茎入药,主要可用于消肿止痛、清热解毒、定惊凉肝等药用功能,可治疗毒蛇咬伤、跌打伤痛、咽喉肿痛、惊风抽搐等病症[2]。现代医学药理研究表明,华重楼化学成分包括甾体皂苷、蜕皮激素及其糖苷、黄酮等,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ等是其重要的生物活性成分和衡量药材质量的重要指标[3],具有抗肿瘤[4-6]、止血镇痛、抗炎抑菌、调节免疫力[7]、促进骨细胞增殖分化等多方面功能[8],为我国传统常用中药云南白药、宫血宁胶囊等 80余种中成药的重要原料[9]。近年来,随着对华重楼野生种质资源的无序开采,许多地区种质资源已濒临灭绝、种质遗传多样性锐减。开展华重楼天然种质收集、保存和评价工作,筛选生物活性成分高的优良种质,对华重楼种质资源保护和合理利用具有十分重要的意义[10]

    目前,国内外对于华重楼的研究集中在化学成分分析与药理活性研究[11-13]、有效成分提取[14]、治疗机制[15-16]和人工育苗、栽培方面[17-18]。而许多药用植物的生物活性成分与原产地气候生态因子密切相关,并在长期进化过程中形成特有的地理种源变异模式。因此研究重楼种质变异规律,优良种质筛选和人工栽培均具有重要意义。陈铁柱等通过研究,证实了我国华重楼西部产区四川、重庆、云南等省7种重楼皂苷甾体含量具有明显差异,与气候生态因子间亦存在密切关系[19]。但现有研究还未能从全分布区尺度反映华重楼主要生物活性成分的种源差异,并系统揭示华重楼根茎总皂苷、总酚酸、黄酮性状指标的地理种源变异模式及其与原产地地理、气候因子的相关关系,同时关于华重楼主要生物活性成分间的相关性分析方面的研究也相对较少。而对药用植物开展种源评价、优良种质鉴定是种植基地选址和遗传改良十分基础的工作。

    本研究在对我国华重楼天然分布区10个种源种质收集的基础上,开展了不同种源根茎器官总酚酸、黄酮、重楼总皂苷和皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ的地理变异规律研究及主要生物活性成分间的相关性分析,旨在为华重楼遗传改良和丰产栽培提供科学依据。

1.   材料与方法
  • 华重楼种源种质收集点选择与地理气候因子信息的收集。首先查阅我国华重楼天然分布范围和分布地点相关资料基础上,设置了河南、湖北、安徽、江西、广东、广西、重庆和湖南8省份10个地理种源收集地点,所采种源样本基本覆盖了华重楼在中国主要地理分布区。各种源所在的地理、生态气候因子见表1。计算种源地与温度相关的气象因子时,以当地气象台站数据为依据,按海拔每上升100 m,温度降低0.55℃进行修正[20]

    种源
    Provenances
    E
    Longitude
    N
    Latitude
    海拔
    Elevation/m
    实际年均温
    Annual mean
    temperature/℃
    实际7月均温
    Mean temperature
    of July/℃
    实际1月均温
    Mean temperature
    of January/℃
    年均降水量
    Annual
    precipitation/mm
    无霜期
    Frost free
    period/d
    全年日
    照时数
    Sunshine
    hours/h
    河南新县114.9831.5560312.5024.50−0.401 287.02222 012.0
    湖北宜昌111.0731.1199112.1422.940.141 138.02951 215.6
    重庆石柱117.8030.2538817.3727.176.871 126.62101 333.3
    安徽祁门117.6230.1021615.1626.863.561 781.42321 816.6
    湖南张家界109.6728.8718316.9033.005.301 400.02431 440.0
    江西丰城115.7327.8314915.8228.924.721 552.12741 935.7
    江西分宜114.5427.6234815.7832.484.381 615.02701 624.0
    广西桂林110.6926.0681312.7924.594.491 761.13001 307.6
    江西信丰114.5825.3432618.6128.117.711 511.02801 810.7
    广东连州112.6324.9452017.2226.526.921 600.02751 510.6

    Table 1.  Geographical locations and meteorological factors of the sampled provenances of Paris polyphylla var. chinensis

    华重楼种源种质的收集。于2018年9月—12月,在每一种源选择4—5 a生,生长健康、发育完好的华重楼植株30株以上,植株间距离40 m以上,采集根茎部作为种源样品。样品采回后,经中国林业科学研究院亚热带林业实验中心植物分类专家王燕良高级工程师鉴定,均为华重楼植株。

  • 先将华重楼根茎样品分单株用清水洗净,放入110℃烘箱杀青30 min,然后在45℃条件下烘干至恒质量。将烘干的样品粉碎过100目筛,作为待测样品。

    总黄酮的测定采用三氯化铝法进行测定[21]。称取粉碎样品0.2 g,3 mL 95%乙醇,50℃水浴超声处理30 min,收集至10 mL容量瓶,重提3次,合并上清液,冷却至刻度,备用。取7 mL上清液于25 mL的比色管中,加入1.5% AlCl3 8 mL和醋酸-醋酸钠的缓冲液(PH 5.5)4 mL,并用50% 乙醇水溶液定容至刻度,摇匀,静置0.5 h,于415 nm下测试吸光度值。配置一系列浓度的标准溶液,按照上述样品溶液的显色方法同步显色,于415 nm下测试吸光度值,以吸光度为纵坐标,显色液中芦丁的质量(mg)为横坐标,作标准曲线,将得到的标准曲线方程计算样品中总黄酮含量。

    总酚酸含量采用高效液相色谱法测定[22]。对照品溶液的制备,取迷迭香酸对照品和丹酚酸B对照品适量,精密称定,加水制成每1 mL含迷迭香酸7 μg、丹酚酸B60 μg的混合溶液,即得。供试品溶液的制备 取供试品5 mg,精密称定,置5 mL量瓶中,加水使溶解,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定时,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10 μL,注入液相色谱仪,测定。色谱条件为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25 cm,内径为4.6 μm,粒径为5 μm);以乙腈为流动相A,以0.05%磷酸溶液为流动相B;检测波长为286 nm;柱温为30℃;流速为每分钟1.0 mL。

  • 重楼皂苷含量采用高效液相色谱法测定[23]。对照品溶液的制备,取重楼皂苷I对照品、重楼皂苷II对照品、重楼皂苷VI对照品及重楼皂苷VII对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL各含0.4 mg的混合溶液,即得。供试品溶液的制备,取样品粉末(过三号筛),称取0.5 g左右样品,精密加入乙醇25 mL,称定质量,加热回流30 min,待冷却后再称定质量,用乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过,进样。色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,梯度洗脱,检测波长为203 nm,进样量10 μL。以下为华重楼样品皂苷的HPLC色谱图(图1)。

    Figure 1.  The HPLC chromatography of phloridzin and trilobatin in Paris polyphylla var. chinensis. sample

  • 利用WPS EXCEL软件进行原始数据的整理、统计;利用SPSS 20. 0 软件进行方差分析、多重比较、相关和聚类分析。

2.   结果与分析
  • 不同种源华重楼根茎主要生物活性成分含量比较(表2)。由表2可以看出,不同种源华重楼根茎生物活性成分含量具有很大差异,总酚酸含量的变异范围为1.718~5.436 mg·g−1,广西桂林种源总酚酸含量最高,达5.436 mg·g−1,是总酚酸含量最低江西新余种源的3.16倍。总黄酮含量的变异范围为0.780~1.457 mg·g−1,含量最高的广西桂林种源与含量最低的安徽祁门种源间相差了1.87倍。不同种源总重楼皂苷(Ⅰ+Ⅱ+Ⅵ+Ⅶ)含量变异幅度为0.107~7.399 mg·g−1,其中江西丰城种源含量最高,河南新县种源含量最低,前者是后者的69.149倍。

    种源
    Provenances
    总酚酸
    Phenolic acid/
    (mg·g−1
    总黄酮 Total flavone /
    (mg·g−1
    皂苷 Saponin/(mg·g−1
    总皂苷
    Total saponin
    (Ⅰ+Ⅱ+Ⅵ+Ⅶ)
    皂苷Ⅰ
    Saponin I
    皂苷Ⅱ
    Saponin Ⅱ
    皂苷Ⅵ
    Saponin Ⅵ
    皂苷Ⅶ
    Saponin Ⅶ
    河南新县2.824 ± 0.747 bc0.990 ± 0.316 abc0.107 ± 0.058 f0.107 ± 0.058 b0.000 ± 0.000 e0.000 ± 0.000 b0.000 ± 0.000 e
    湖北宜昌3.186 ± 0.895 bc1.128 ± 0.275 abc0.690 ± 0.252 ef0.025 ± 0.030 b0.244 ± 0.138 cd0.008 ± 0.022 b0.414 ± 0.210 de
    重庆石柱3.090 ± 0.824 bc1.363 ± 0.576 ab2.868 ± 1.776 de0.684 ± 0.596 b0.598 ± 0.650 abc0.088 ± 0.117 b1.497 ± 1.756 cde
    安徽祁门2.045 ± 0.991 c0.780 ± 0.199 c9.494 ± 2.739 a0.008 ± 0.017 b0.266 ± 0.180 bcd0.051 ± 0.043 b9.170 ± 2.629 a
    湖南张家界2.743 ± 0.598 bc1.437 ± 0.661 a6.597 ± 1.100 bc2.106 ± 2.684 a0.646 ± 0.586 ab0.521 ± 0.858 a3.324 ± 1.623 ab
    江西丰城2.167 ± 0.753 bc0.977 ± 0.205 abc7.399 ± 3.382 ab0.035 ± 0.035 b0.235 ± 0.065 cd0.004 ± 0.011 b7.123 ± 3.356 a
    江西分宜1.718 ± 0.303 c0.893 ± 0.234 bc4.478 ± 2.665 cd0.102 ± 0.088 b0.325 ± 0.147 bcd0.243 ± 0.388 b3.807 ± 2.177 ab
    广西桂林5.436 ± 2.579 a1.457 ± 0.522 a0.806 ± 0.521 ef0.682 ± 0.544 b0.000 ± 0.000 e0.000 ± 0.000 b0.123 ± 0.080 e
    江西信丰2.000 ± 0.480 c0.992 ± 0.309 abc5.207 ± 2.219 bc0.366 ± 0.274 b0.640 ± 0.475 ab0.074 ± 0.142 b4.128 ± 2.057 b
    广东连州3.594 ± 1.318 b1.395 ± 0.424 a5.205 ± 1.968 bc1.811 ± 1.652 a0.715 ± 0.402 a0.042 ± 0.039 b2.639 ± 2.903 bcd
    均值2.964 ± 1.569**1.125 ± 0.430**4.041 ± 3.706**0.491 ± 0.967**0.326 ± 0.391**0.068 ± 0.215**3.155 ± 3.690**
      注:表中数据为平均值 ± 标准差。用Duncan法进行多重比较。同列标有不同小写字母表示组间差异显著(p < 0.05),同列标有相同小写字母表示组间差异不显著(p > 0.05),**表示差异极显著(p < 0.01)。
      Note: The data in the table are average and standard deviation(Mean ± SE). Multiple comparison was carried out by using Duncan method,The data with different small letters in column means significant difference(P < 0.05), The data with same small letters in column means unsignificant difference (P > 0.05), **means extremely significant difference (p < 0.01).

    Table 2.  The difference of main medicinal active constituents contents of Paris polyphylla var. chinensis from different provenances

    在华重楼根茎重楼皂苷Ⅰ、皂苷Ⅱ、皂苷Ⅵ和皂苷Ⅶ含量中,皂苷Ⅰ的变异范围为0.008~2.106 mg·g−1,皂苷Ⅱ的变异范围为0.000~0.646 mg·g−1,皂苷Ⅵ的变异范围为0.000~0.521 mg·g−1,皂苷Ⅶ的变异范围为0.00~9.170 mg·g−1。其中河南新县种源未能检出皂苷Ⅱ、皂苷Ⅵ和皂苷Ⅶ号含量,广西桂林种源未能检出皂苷Ⅱ、Ⅵ含量。方差分析表明,不同种源华重楼根茎总酚酸、总黄酮、总皂苷(Ⅰ+Ⅱ+Ⅵ+Ⅶ)、皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和皂苷Ⅶ的含量均存在极显著差异(P < 0.01)。

  • 对华重楼根茎主要活性成分含量与气候生态因子间的相关性的显著性检验表明,华重楼根茎总酚酸含量与海拔、总黄酮含量与全年日照时数、皂苷Ⅱ含量与1月均温间相关性显著(P < 0.05),相关系数值分别为0.662、−0.708和0.752。说明总酚酸含量与海拔、皂苷Ⅱ含量与1月均温间存在中度正相关关系,总黄酮含量与全年日照时数间存在中度负相关关系。总皂苷含量与海拔、皂苷Ⅱ与年均温、皂苷Ⅵ含量与7月均温、皂苷Ⅶ含量与海拔的相关性极显著(P < 0.01),其相关系数分别达到−0.840、0.877、0.821和−0.766,表明总皂苷与海拔间呈高度负相关,皂苷Ⅱ与年均温、皂苷Ⅵ与7月均温间存在高度正相关关系,皂苷Ⅶ含量与海拔存在中度正相关关系。总酚酸含量与东经和全年日照时数、总黄酮与东经、皂苷Ⅰ与东经相关系数较小且达未到显著水平(P > 0.05)但存在较弱的负相关性,而总皂苷含量与年均温和7月均温,皂苷Ⅶ含量与年均降雨量间存在一定的正相关性(表3)。

    项目
    Items
    E
    Longitudegitude
    N
    Latitude
    海拔
    Elevation/m
    年均温
    Annual mean
    temperature/℃
    7月均温
    Mean temperature
    of July/℃
    1月均温
    Mean temperature
    of January/℃
    年均降雨量
    Annual
    precipitation/mm
    无霜期
    Frost free
    period/d
    全年日照时数
    Sunshine
    hours/h
    总酚酸 Phenolic acid−0.522−0.2100.662*−0.426−0.531−0.0390.0700.335−0.591
    总黄酮 Total flavone−0.587−0.2690.2980.087−0.0580.331−0.2040.113−0.708*
    总皂苷 Total saponin0.328−0.228−0.840**0.6020.5820.4660.504−0.1620.375
    皂苷Ⅰ Saponin I−0.535−0.376−0.1510.4290.3480.480.010−0.050−0.39
    皂苷Ⅱ Saponin Ⅱ−0.007−0.379−0.4280.877**0.4670.752*−0.159−0.135−0.213
    皂苷Ⅵ Saponin Ⅵ−0.375−0.004−0.4580.3880.821**0.247−0.049−0.215−0.194
    皂苷Ⅶ Saponin Ⅶ0.494−0.107−0.766**0.4150.4280.2800.535−0.1310.515
      注:* 表示在 0.05 水平(双侧)上显著相关。** 在 0.01 水平(双侧)上极显著相关,下同。
      Note: * means significant correlation was found at 0.05 level (2-tailel). **means significant correlation was found at 0.01 level (2-tailed), the same as below.

    Table 3.  Correlation analysis of main medicinal active constituen and ecological factors of Paris polyphylla var. chinensis

  • 表4可以看出,华重楼根茎中总酚酸与总黄酮含量、皂苷Ⅰ与皂苷Ⅱ含量间相关性显著,其相关系数分别为0.753、0.777和0.637。说明华重楼根茎中总酚酸与总黄酮含量、总黄酮与皂苷Ⅰ含量、皂苷Ⅰ与皂苷Ⅱ含量呈中度正相关。总黄酮与皂苷Ⅰ含量和总皂苷与皂苷Ⅶ间的相关性达极显著水平,总皂苷与皂苷Ⅶ的相关系数为0.941,说明总皂苷与皂苷Ⅶ含量呈高度正相关。其它指标间的相关性均未达到显著性水平,但总酚酸含量与总皂苷、总酚酸与皂苷Ⅶ含量、总黄酮与皂苷Ⅶ含量相关系数均存在负相关性,皂苷Ⅰ与皂苷Ⅵ呈正相关性。

    项目
    Items
    总酚酸
    Phenolic acid
    总黄酮
    Total flavone
    总皂苷
    Total saponin
    皂苷Ⅰ
    Saponin I
    皂苷Ⅱ
    Saponin Ⅱ
    皂苷Ⅵ
    Saponin Ⅵ
    皂苷Ⅶ
    Saponin Ⅶ
    总酚酸 Phenolic acid10.753*−0.5680.324−0.273−0.259−0.63
    总黄酮 Total flavone1−0.3390.777**0.3180.254−0.588
    总皂苷 Total saponin10.1460.4250.3210.941**
    皂苷Ⅰ Saponin I10.637*0.597−0.190
    皂苷Ⅱ Saponin Ⅱ10.4670.165
    皂苷Ⅵ Saponin Ⅵ10.085
    皂苷Ⅶ Saponin Ⅶ1

    Table 4.  Analysis of correlation between main medicinal active constituent of Paris polyphylla var. chinensis

  • 以华重楼根茎总酚酸、黄酮和皂苷含量为特征指标,对10个华重楼种源聚类分析结果(图2)。从图2可以看出,以欧式距离15为分界阈值,可将华重楼种源聚类为3个类群,分别为低酚酸、低黄酮、高皂苷含量类群,高酚酸、高黄酮、低皂苷类群和中酚酸、中黄酮、中皂苷类群。其中安徽祁门种源属低总酚酸、低黄酮和高皂苷含量类群,河南新县、湖北宜昌和重庆石柱属高酚酸、高黄酮、低皂苷类群,其余种源属中酚酸、中黄酮、中皂苷类群。

    Figure 2.  Cluster Analysis of phloridzin and trilobatin and total saponin contents in Paris polyphylla var. chinensis of different provenances

3.   讨论
  • 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ等4种活性成分含量是中药材重楼质量的主要评价标准。本研究表明不同种源间华重楼根茎中总酚酸、总黄酮和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ 4个重楼皂苷及其总含量差异极显著。从种源所处的地理位置来看,华重楼分布区北部种源重楼皂苷含量总体低于中南部种源含量。因此,今后在华重楼的中南部种源开展优良种质选择或开展人工仿生栽培,将取得较好的效果。

    本研究通过对华重楼根茎中总酚酸、总黄酮和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ 4个重楼皂苷及其总含量与其原产地气候地理因子的相关分析表明,原产地海拔分布高的华重楼种源,具有较高的总酚酸含量,但其总皂苷含量和皂苷Ⅶ较低,年均温和1月均温较高的种源根茎中皂苷Ⅱ含量相应较高,7月均温高的种源皂苷Ⅵ含量相应较高,而全年日照数高的种源总黄酮含量较低。因此,在海拔低、年均温、1月均温和7月均温高的地区开展华重楼优良种质筛选工作,更易于获得重楼总皂苷、皂苷Ⅱ、皂苷Ⅵ和皂苷Ⅶ含量高的优良种质,而在海拔高和全年日照时数少的地区更容易筛选到高总酚酸和总黄酮含量的优良种质。

    华重楼根茎中总酚酸与总黄酮含量、总黄酮与皂苷Ⅰ含量、皂苷Ⅰ与皂苷Ⅱ含量呈中度正相关关系,总皂苷与皂苷Ⅶ含量呈高度正相关关系。这说明通过对这些具有相关性次生代谢物二者中一个指标的检测,可以初步评估另外一个指标含量的高低。这种方法在野外样品选优评价的初选阶段,可以有效降低样品检测的工作量,提高评价效率。本研究中总酚酸与总黄酮,总黄酮与皂苷Ⅰ类别之间的显著正相关性,可能与这些次生代谢物对原产地复杂生态环境因子响应具有高度相似性有关,此方面还有待于进行更深入的研究。

    本研究证实了不同种源华重楼根茎主要生物活性成分含量存在极显著差异,然而对华重楼生物活性成分形成地理种源差异的机制尚不明确,有待于在其全分布区进行多点种源试验,解析其主要生物活性成分的形成机制。

4.   结论
  • 不同种源间华重楼根茎中总酚酸、总黄酮和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ4个重楼皂苷及其总含量差异极显著。广西桂林为总酚酸和总黄酮含量最高的种源,安徽祁门为总重楼皂苷含量最高的种源。华重楼根茎中总酚酸含量与原产地海拔、皂苷Ⅱ与1月均温呈中度正相关关系,总黄酮含量与全年日照时数、皂苷Ⅶ与海拔呈中度负相关关系。总皂苷与海拔间呈高度负相关关系,皂苷Ⅱ与年均温、皂苷Ⅵ与7月均温间均呈高度正相关关系;华重楼根茎中总酚酸与总黄酮含量、总黄酮与皂苷Ⅰ含量、皂苷Ⅰ与皂苷Ⅱ含量呈中度正相关关系,总皂苷与皂苷Ⅶ含量呈高度正相关关系。通过聚类分可将华重楼种源划分为三个类群,安徽祁门属低酚酸、低黄酮、高皂苷类群;河南新县、湖北宜昌和重庆石柱属高酚酸、高黄酮、低皂苷类群;湖南张家界、江西丰城、江西分宜、广西桂林、江西信丰和广东连州属中酚酸、中黄酮和中皂苷类群。

Reference (23)

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